haemtech Haematologic Technologies，Inc。（HTI/haemtech）是一家ISO 9001：2015注冊(cè)公司，是一家專(zhuān)業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點(diǎn)是凝血級(jí)聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì)，以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過(guò)150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì)，包括酶原，酶，輔因子和抑制劑，以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管，用于臨床研究。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化，蛋白質(zhì)修飾，化驗(yàn)開(kāi)發(fā)，合同制造和合同研究。

haemtech HCII-0190說(shuō)明書(shū)

Human Heparin Cofactor II

人肝素輔助因子II

肝素輔因子II抑制凝血酶
凝血酶（IIa），肝素（HEP）和肝素輔因子II（HCII）通過(guò)隨機(jī)順序雙反應(yīng)機(jī)制相互作用形成三元復(fù)合物。隨著凝血酶與肝素輔助因子II形成共價(jià)復(fù)合物，肝素隨后從復(fù)合物解離。

HCII-0190 Human Heparin Cofactor II

肝素輔助因子II（HCII）（肝素輔助因子A，抗凝血酶BM，硫酸皮膚素輔因子，人類(lèi)leuserpin-2）是絲氨酸蛋白酶抑制劑（絲氨酸蛋白酶抑制劑）家族的單鏈糖蛋白（Mr = 65,600,10％碳水化合物）成員（1- 3）。肝素輔因子II的氨基酸序列分析顯示3個(gè)潛在的N-糖基化位點(diǎn)和2個(gè)位于NH2-末端附近的7個(gè)殘基的兩個(gè)內(nèi)部重復(fù)的硫酸化酪氨酸（4-6）。血漿濃度估計(jì)為90μg/ ml（2）。

在凝血級(jí)聯(lián)中，肝素輔助因子II通過(guò)在存在（k2 = 4.5×10 8 M -1 min -1）和不存在（k2 = 5.0×10 5 M -1 min -1）的情況下形成雙分子復(fù)合物來(lái)抑制凝血酶。）肝素（2,7-9）。這種復(fù)合物對(duì)變性劑是穩(wěn)定的并且基本上是不可逆的。除肝素外，多種多陰離子化合物可加速HCII對(duì)凝血酶的抑制作用（3）。在這些化合物中值得注意的是硫酸皮膚素，其加速HCII對(duì)凝血酶的抑制，但不加速抗凝血酶III（1,6）。該特征已被用于開(kāi)發(fā)特異于肝素輔助因子II的基于血漿的測(cè)定。盡管HCII與其他serpins僅顯示約25％的序列同源性，但凝血酶抑制時(shí)釋放的反應(yīng)位點(diǎn)肽（COOH-末端36個(gè)氨基酸）與凝血酶從抗凝血酶III（AT III）釋放的反應(yīng)位點(diǎn)肽同源性為53％（4,9） ）。HCII中的易斷裂鍵是Leu-Ser，這對(duì)于精氨酸特異性蛋白酶抑制劑是不常見(jiàn)的（4,9）。與AT III相比，HCII抑制的僅有凝血蛋白酶是凝血酶，HCII抑制的其他蛋白酶包括α-胰凝乳蛋白酶，中性粒細(xì)胞組織蛋白酶G和灰色鏈霉菌蛋白酶B（3）。肝素輔助因子II的主要生理作用可能仍有待發(fā)現(xiàn)。

通過(guò)修改Griffith等人的方法（9），從新鮮冷凍血漿制備肝素輔助因子II。在SDS PAGE上評(píng)估純度，并且基于在肝素存在下的凝血酶抑制來(lái)確定活性。HCII以50％（體積/體積）甘油/ H 2 O供應(yīng)，在-20℃下儲(chǔ)存。

參考

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出版物

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2. Reis，C.，et al。，Biochem。J.（2006）398,295-302（凝血酶原激活）

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