omegabiotek D6943-01說明書
E.Z.N.A.® Plasmid Mini Kit I, (V-spin)
使用旋轉(zhuǎn)微型柱從1-5mL細(xì)菌培養(yǎng)物中分離質(zhì)粒DNA
SKU：D6943-01類別：細(xì)菌質(zhì)粒標(biāo)簽：D6943-00，D6943-01，D6943-02
EZNA®PlasmidMini Kit I設(shè)計(jì)用于在30分鐘或更短的時(shí)間內(nèi)從1-5 mL細(xì)菌培養(yǎng)物中分離出多達(dá)30μg的高質(zhì)量質(zhì)粒DNA。使用HiBind®MiniColumn技術(shù)將質(zhì)粒DNA純化簡化為三個(gè)快速步驟：結(jié)合，洗滌和洗脫。純化的質(zhì)粒DNA可立即用于各種下游應(yīng)用，例如常規(guī)篩選，限制酶消化和手動(dòng)/自動(dòng)熒光DNA測序。
EZNA®質(zhì)粒微型試劑盒可提供2種不同類型的色譜柱：V型旋轉(zhuǎn)色譜柱帶有附加蓋（D6943），而Q型離心色譜柱則無蓋（D6942）。在使用和應(yīng)用方面，這些柱子是相同的。兩種色譜柱均可與真空或離心方案一起使用。
僅供研究使用。不用于診斷過程。
| 特征 | 產(chǎn)品規(guī)格 |
|---|---|
| 下游應(yīng)用 | 克隆; 桑格排序，轉(zhuǎn)型等 |
| 起始材料 | 1-5mL LB培養(yǎng)物 |
| 質(zhì)粒類型 | 高拷貝，低拷貝，粘粒DNA |
| 處理模式 | 手動(dòng)，離心或真空 |
| 吞吐量 | 1-24 |
| DNA結(jié)合技術(shù) | 硅膠微型旋轉(zhuǎn)柱 |
| 裂解液清除方法 | 離心 |
| 處理時(shí)間 | <30分鐘 |
| 產(chǎn)量 | 高拷貝數(shù)15-25μg; 低拷貝數(shù)0.1-5μg |
| 特別說明 | 停用酵母質(zhì)粒試劑盒的替代方案 |
| 項(xiàng)目 |
|---|
| HiBind®DNA微型柱 |
| 2 mL收集管 |
| 解決方案一 |
| 解決方案II |
| 解決方案III |
| HBC緩沖液 |
| DNA洗滌緩沖液 |
| RNase A. |
| 洗脫緩沖液 |
DNA濃度比較
圖1. 根據(jù)制造商推薦的方案進(jìn)行用pGEM載體轉(zhuǎn)化的4mLDH5α培養(yǎng)物。通過NanoDrop®2000c的光密度測量確定質(zhì)粒DNA濃度。總洗脫體積為50μL。
超卷曲DNA
圖2. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案分離用pGEM載體轉(zhuǎn)化的1mLDH5α培養(yǎng)物。在1％瓊脂糖凝膠上分析5μL洗脫物質(zhì)粒DNA。
Nanodrop的DNA定量分析
表1. 用pGEM載體轉(zhuǎn)化的1mLDH5α培養(yǎng)物。通過NanoDrop®2000c的光密度測量確定質(zhì)粒DNA濃度。總洗脫體積為50μL。
桑格測序
表2. 用EZNA質(zhì)粒Mini Kit I純化的質(zhì)粒DNA用于5μLSanger測序反應(yīng)。在Applied Biosystems 3730XL上分析DNA。
內(nèi)毒素水平
表3. 質(zhì)粒DNA制備物中的內(nèi)毒素。按照每個(gè)制造商推薦的方案，從0.8mL LB培養(yǎng)物中分離質(zhì)粒DNA。用Thermo Scientific的Pierce LAL Chromogenic Endotoxin Quantitation Kit測定內(nèi)毒素水平。
